实验背景: 现有一段包含目标致病突变的 DNA 序列。作为生物科学家,您需要精心选择或设计一条单链引导 RNA(sgRNA)来引导 Cas9 核酸酶精准切割。
💡 教学提示: 将鼠标悬停在不同的 sgRNA 卡片上,观察上方大屏幕中哪些碱基变红(匹配区域)。
🎯 编辑位点: 第23位碱基 T 为目标致病突变位点(已用黄色高亮)。
🧬 目的基因靶向 DNA 序列 (5' → 3')
sgRNA - A
CCUGAGGUG
特异性评估中... (悬停查看绑定靶点)
sgRNA - B
GUGAAGUCU
⚠️ 脱靶风险!悬停可见两个结合位点。
操作流程指南: ✨ 请用鼠标拖动左侧的彩色 sgRNA 链条,将其嵌入到右侧大大的 Cas9 蛋白质空槽中,形成复合体!
当前状态:等待组装 CRISPR-Cas9 复合体
⚠️ 警报:DNA 双链断裂 (DSB)!
Cas9 酶已成功切断双螺旋结构。细胞启动了紧急自我修复机制,请选择你想观察或诱导的修复途径:
⚡ 非同源末端接合 (NHEJ)
随机快速缝合,容易引入插入/缺失突变,常用于基因敲除。
🧩 同源介导修复 (HDR)
提供外源同源模板,实现精准基因替换/修复或定点插入。